雌三醇乳膏的使用方法是在晚上就寝之前使用，先拧去乳膏管的盖子，将管口向上，用尖物戳开管口，再将给药器开口旋上乳膏管口，挤压乳膏管将乳管挤进给药器，直至给药器的推进器停止，将给药器开口从乳膏管口上旋下并用盖子将乳膏管口盖上。

受药者平躺下，将给药器末端插入阴道底，慢慢推动推进器，将药物全部打入到阴道中。用完后，将推进器拔出给药器管，并将两个部分都用温肥皂水清洗。请勿用清洁剂。然后用清水漂洗干净。

用于不同的疾病时用法用量不同，具体如下。用于尿道下部的萎缩，第一周内每天使用一次，然后根据症状缓解情况逐渐减低至维持量（例如每周使用两次）。对于尿失禁，有些妇女可能需要较高的维持量。

用于绝经后妇女阴道术前和术后，在手术前两周每天一次，术后两周内每周两次。

用于可疑的萎缩性宫颈涂片辅助诊断时，在下次涂片检查之前一周内每两天一次。

若在使用过程中出现异常反应，如过敏、用药部位刺激和瘙痒、乳房疼痛等情况，请立即停止使用并寻求医生的帮助。同时，对于存在患有乳腺癌、子宫内膜癌等禁忌证的患者，请在使用前向医生咨询。